心肌梗死是一种严重的心血管疾病，由于冠状动脉血供急剧减少或中断，使心肌持续性缺血缺氧以致坏死，损害心功能且可能导致心律失常、休克以及心力衰竭等严重后果，已成为威胁人类生命健康的重大疾病之一。

目前建立心肌梗死动物模型的方法有多种，包括：冠脉结扎法、药物法、球囊堵闭法、栓塞法以及血栓形成法等。今天小助手根据粉丝们的后台留言，今天输出冠脉结扎法的实操步骤。

一、首先认识心脏的结构

 

冠状动脉结扎法操作简单、血管阻塞明确，比较符合心梗发生的病理过程，能较好的实现临床转化。

二、模型构建方法

1、术前准备：

实验小鼠术前禁食 12 h。将小鼠放进麻醉机的诱导箱，开启氧气调节气流量 (0.25 MPa，1 L/min)，调整麻醉药（异氟烷）浓度为 5%，约 1 min 完成小鼠诱导麻醉，之后调整麻醉药浓度至 2%，连接小鼠面罩并持续吸入。

2、手术操作：

小鼠仰卧位固定，左胸前手术区域剔除鼠毛并消毒。距胸骨左缘约1~2mm 皮肤处做长约1.5cm纵向切口，切口处行垂直外翻褥式缝合预留缝线。逐层钝性分离胸壁肌肉，从第3或第4 肋间隙快速进入胸腔，用止血钳撑开肋间隙，配合心脏跳动左手轻轻挤压使心脏从孔隙中弹出。在左心耳下缘1~2mm、肺动脉圆锥旁 0.5mm处以8-0带线缝合针穿过冠状动脉前降支将其结扎，松紧适宜，控制进针深度（以隐约可见细针为宜）和行针宽度（2mm左右），当看到左心室前壁外表面变成苍白色时证明缺血成功。

由于不借助通气装置，要求开胸时间不要超过30s，结扎操作尽量控制在10s左右完成。结扎完成后轻柔地将心脏送回胸腔，挤压胸腔排出空气同时收紧结扎切口处预留缝线，完成手术。术中逐步调整麻药浓度至零，取下面罩后将小鼠置于恒温垫上约3~5 min 即可复苏。

三、模型评价方法及结果分析

1、心电图判断：心肌梗死会导致心电图出现特定的异常波形，如 ST 段抬高、T波倒置等。

心肌梗死的心电图

 

2、超声检查心功能：在心肌梗死模型中，超声心动图通常显示心脏扩大、心肌变薄、心肌收缩功能下降等。

3、TTC染色和病理染色。

4、心肌酶谱检测：肌红蛋白、肌钙蛋白及肌酸激酶同工酶。

四、技术要领

① 快：短时间内完成冠脉结扎术，尽快完成冠脉结扎并闭合胸壁，降低长时间暴露胸腔可能导致心律失常、气胸等致死风险。

② 准：冠脉结扎位置的选择至关重要，由于小鼠血管细小，侧枝循环丰富且走行不易观察，因此要求实验者操作精确，既要保证能够引起足够面积的心肌梗死，又要避免梗死面积过大而导致死亡，尽量在同一高度结扎形成较为一致的模型；

③ 稳：小鼠心室壁较薄，操作者需要严格控制穿刺深度，避免穿刺过深直接刺破室壁造成大出血。