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讲PAS染色,您还有什么不懂?

人阅读 发布时间:2020-12-03 13:26

PAS染色全称为过典酸雪夫氏染色(schiff periodic acid shiff, PAS),又称糖原染色。一般用来显示糖原和其它多糖物质。

染色原理
细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过典酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。

染色步骤
1、组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多巨甲醛固定后水洗);
2、滴加过典酸溶液,氧化5min;
3、蒸馏水洗10min;
4、滴加Schiff试剂,侵染10-20min;
5、倾去Schiff 试剂,流水冲洗10min;
6、滴加苏木素染色液,染核1-2min;
7、流水冲洗5min;
8、酸性乙醇分化液分化;
9、Scott反蓝水洗3min;
10、常规透明、封片。

染色结果
PAS染色结果    PAS染色结果
PAS染色结果
糖原、多糖类物质及其他PAS反应阳性物质呈紫红色,细胞核呈蓝色。

注意事项
1、高典酸溶液为透明溶液,配制后放4度冰箱备用,无法从常规的颜色辨别高典酸的好坏,需要定期更换;
2、染色试剂均应低温保存,临用前半小时取出恢复室温;
3、Schiff染液染色时间可随温度调整,室温高可减少染色时间,冬季室温低,可延长至20 min左右。
 

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